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基因敲除/敲入細胞系建立

       CRISPR Cas9 是一種由RNA指導(dǎo)Cas核酸酶對靶向基因進行特定基因修飾的技術(shù)，是細菌和古細菌在長期應(yīng)對病毒和質(zhì)粒不斷攻擊而演化過程中形成的一種適應(yīng)性免疫防御機制，其原理是Cas9蛋白通過導(dǎo)向性RNA（guide RNA，sgRNA）識別特定基因組位點并進行剪切， 它能夠共定位 RNA、DNA 和蛋白，從而擁有巨大的改造潛力。將蛋白與無核酸酶的 Cas9(Cas9 nuclease-null)融合，并表達適當(dāng)?shù)?nbsp;gRNA，即可靶定任何 dsDNA 序列，而 RNA 可連接到gRNA 的末端，不影響 Cas9 的結(jié)合。因此，Cas9 能在任何 dsDNA 序列處帶來任何融合蛋白及 RNA，這為生物體的研究和改造帶來巨大潛力。目前已被廣泛應(yīng)用于基因組的精確編輯修飾，爾丙生物可以提供基于CRISPR / Cas9系統(tǒng)的基因敲除穩(wěn)定細胞系以及基因敲除小鼠服務(wù)。

服務(wù)流程

1，細胞分型；

2，細胞預(yù)實驗；

3，針對敲除/敲入目的基因設(shè)計合適靶點；

4，構(gòu)建 cas9-gRNA表達質(zhì)粒并測序驗證；

5，目的細胞培養(yǎng)，并將構(gòu)建好的表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞；

6，抗性篩選獲得單克隆細胞；

7，基因敲除細胞系的檢測。

客戶提供

1. 待敲除目的基因信息，即靶向DNA信息；

2. 需構(gòu)建敲除株的細胞信息，如客戶提供細胞，新鮮細胞，灌滿培養(yǎng)基運輸，或細胞凍存管，干冰運輸。

結(jié)果交付

1，基因敲除穩(wěn)定細胞株；

2，驗證報告；

3，詳細實驗報告（試劑耗材、儀器設(shè)備、操作）及相關(guān)原始數(shù)據(jù)。

基因編輯細胞信息由康旭禾生物科技有限公司為您提供，如您想了解更多關(guān)于基因編輯細胞報價、型號、參數(shù)等信息，歡迎來電或留言咨詢。