生物實驗小白必備:細胞劃痕實驗步驟詳解
除了transwell外,我們還可以用細胞劃痕實驗(cell ctratch test或wound healing assay)驗證細胞遷移能力。
1.培養板劃線標記:通常隔0.5-1cm劃線,至少3條線;
2.細胞鋪板:每孔接種5x105個細胞,數量可根據狀態調整,但一定要鋪勻(十字法或8字法)
3.細胞劃線:200ul槍頭垂直橫線劃線,盡量保證力度一致;
4.去除劃下細胞:PBS洗滌2-3次,然后換無血清或低血清培養基培養細胞,根據實驗目的進行藥物處理或其他;
5.觀察與計數:放入37攝氏度5%CO2培養箱孵育,適當時間取出進行拍照。注意:若藥物處理后細胞形態變化,我們0h觀察點可先將6孔板放入培養箱幾分鐘后再拿出來觀察