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- 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)
- 動(dòng)物飼養(yǎng) 疾病造模 行為學(xué)檢測(cè) 心功能 無(wú)創(chuàng)血壓 血常規(guī) 全自動(dòng)生化檢測(cè)等
- 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)
- CCK8/MTT 原代細(xì)胞分離 流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞劃痕 侵襲 遷移 EDU染色 轉(zhuǎn)染 穩(wěn)定株篩選
科研干貨分享 | 常見(jiàn)的Cre小鼠和flox小鼠是什么意思？
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發(fā)表時(shí)間：2025-07-09
在生物醫(yī)學(xué)研究中，Cre小鼠和flox小鼠是兩種非常重要的基因工程工具鼠，廣泛應(yīng)用于基因功能研究、疾病模型構(gòu)建等領(lǐng)域。它們通過(guò)Cre-loxP系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)條件性基因操作，幫助科學(xué)家在特定組織或時(shí)間點(diǎn)精確調(diào)控基因表達(dá)。
No.1
Cre小鼠
●定義：Cre小鼠是一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其基因組中插入了Cre重組酶基因。Cre重組酶可以識(shí)別并切割特定的DNA序列——loxP位點(diǎn)。
●作用：Cre重組酶能夠介導(dǎo)兩個(gè)loxP位點(diǎn)之間的DNA重組，從而刪除、倒位或插入特定的基因片段。
●特點(diǎn)：
? Cre表達(dá)可以由組織特異性啟動(dòng)子控制，實(shí)現(xiàn)特定
組織中的基因操作。
? 也可以與誘導(dǎo)系統(tǒng)（如Tamoxifen誘導(dǎo)）結(jié)合，實(shí)
現(xiàn)時(shí)間特異性的基因操作。
●常見(jiàn)類(lèi)型：
? 組織特異性Cre小鼠：如肝臟特異性（Alb-Cre）、神經(jīng)元特異性（Nestin-Cre）、心肌細(xì)胞特異性（αMHC-Cre）等。
? 誘導(dǎo)型Cre小鼠：如Tamoxifen誘導(dǎo)的Cre-ERT2小鼠，只有在給予誘導(dǎo)劑時(shí)才會(huì)激活Cre重組酶。
No.2
flox小鼠
●定義：flox小鼠是一種基因修飾小鼠，其目標(biāo)基因的兩側(cè)被插入loxP位點(diǎn)（即“floxed”基因）。"flox"是"flanked by loxP"的縮寫(xiě)。
●作用：當(dāng)flox小鼠與Cre小鼠交配后，Cre重組酶會(huì)識(shí)別loxP位點(diǎn)并切除兩個(gè)loxP位點(diǎn)之間的基因序列，從而實(shí)現(xiàn)條件性基因敲除。
●特點(diǎn)：
? 在沒(méi)有Cre重組酶的情況下，floxed基因正常表達(dá)，小鼠表型通常與野生型無(wú)異。
? 當(dāng)Cre重組酶存在時(shí)，floxed基因被刪除，從而實(shí)現(xiàn)組織特異性或時(shí)間特異性的基因敲除。
●常見(jiàn)應(yīng)用：用于研究特定基因在特定組織或發(fā)育階段的功能。
No.3
Cre小鼠與Flox小鼠的區(qū)別
1. 基因修飾方式不同：
●Cre小鼠通過(guò)表達(dá)Cre重組酶，主動(dòng)對(duì)基因進(jìn)行切割和重排。
●flox小鼠則通過(guò)在目標(biāo)基因兩側(cè)插入loxP位點(diǎn)，等待與Cre小鼠交配后實(shí)現(xiàn)條件性基因敲除。
2. 基因型與表型的關(guān)系：
●Cre小鼠的基因型為Cre+/-(攜帶一個(gè)Cre基因)、Cre-/- (不攜帶Cre基因)和Cre+/+ (攜帶兩個(gè)Cre基因)。
其中，Cre+/+的小鼠由于可能來(lái)自不同品系的Cre基因而導(dǎo)致遺傳背景復(fù)雜，通常不作為理想模型使用。
●flox小鼠的基因型為flox/flox (兩個(gè)等位基因均被錨定)、flox/- (一個(gè)等位基因被錨定，另一個(gè)為野生型)和-/- (野生型)。一般情況下，flox/flox和flox/-小鼠均可作為野生型對(duì)照，除非flox/flox小鼠的基因表達(dá)受到意外影響而出現(xiàn)異常表型。
3. 應(yīng)用場(chǎng)景不同：
●Cre小鼠主要用于構(gòu)建條件性基因敲除模型，通過(guò)與flox小鼠交配實(shí)現(xiàn)對(duì)特定組織或時(shí)間點(diǎn)的基因敲除。
●flox小鼠則作為基因敲除的靶標(biāo)，用于評(píng)估基因功能、研究疾病機(jī)制及篩選藥物靶點(diǎn)。
No.4
Cre小鼠和flox小鼠的應(yīng)用
●組織特異性基因敲除：通過(guò)將組織特異性Cre小鼠與flox小鼠交配，可以在特定組織中敲除目標(biāo)基因。
●例如：
? 肝臟特異性敲除：Alb-Cre小鼠 + floxed基因小鼠。
? 神經(jīng)元特異性敲除：Nestin-Cre小鼠 + floxed基因小鼠。
時(shí)間特異性基因敲除：通過(guò)將誘導(dǎo)型Cre小鼠（如Cre-ERT2）與flox小鼠交配，可以在特定時(shí)間點(diǎn)（如給予Tamoxifen后）敲除目標(biāo)基因。
基因功能研究：通過(guò)條件性基因敲除，研究基因在特定組織或發(fā)育階段的功能。
疾病模型構(gòu)建：利用Cre-loxP系統(tǒng)構(gòu)建復(fù)雜的疾病模型，如癌癥、代謝疾病、神經(jīng)退行性疾病等。
No.5
注意事項(xiàng)
1. 條件性基因敲除：通過(guò)將Cre小鼠與flox小鼠配，可以在特定組織或發(fā)育階段實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)基因的敲除。這種技術(shù)允許研究基因在特定環(huán)境下的功能，避免了傳統(tǒng)基因敲除模型中可能出現(xiàn)的胚胎致死等問(wèn)題。例如，利用Cre-loxP系統(tǒng)，研究人員可以特異性敲除小鼠神經(jīng)細(xì)胞中的某個(gè)基因，以探討該基因在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和功能中的作用。
2. 疾病模型構(gòu)建：Cre小鼠和flox小鼠的結(jié)合使用為構(gòu)建各種人類(lèi)疾病模型提供了有力手段。通過(guò)模擬特定基因在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制，這些模型不僅有助于深入理解疾病的病理過(guò)程，也為藥物篩選和療效評(píng)估提供了寶貴的平臺(tái)。例如，在研究阿爾茨海默病時(shí)，可以利用Cre-loxP系統(tǒng)特異性敲除與疾病相關(guān)的基因，觀察小鼠的認(rèn)知功能變化及病理特征。
3.藥物研發(fā)：在藥物研發(fā)領(lǐng)域，Cre小鼠和flox小鼠的應(yīng)用也日益廣泛。通過(guò)構(gòu)建特定基因敲除的小鼠模型，科研人員可以評(píng)估藥物對(duì)疾病表型的影響，篩選潛在的治療靶點(diǎn)。此外，這種技術(shù)還可以用于研究藥物在不同組織或發(fā)育階段的作用機(jī)制，為優(yōu)化藥物設(shè)計(jì)提供重要依據(jù)。
No.6
實(shí)際應(yīng)用案例
●案例1：研究肝臟中某基因的功能
選擇肝臟特異性Cre小鼠（如Alb-Cre）與floxed基因小鼠交配。
后代小鼠中，目標(biāo)基因僅在肝臟中被敲除，從而研究該基因在肝臟中的功能。
●案例2：構(gòu)建時(shí)間特異性基因敲除模型
選擇誘導(dǎo)型Cre小鼠（如Cre-ERT2）與floxed基因小鼠交配。
在特定時(shí)間點(diǎn)給予Tamoxifen，激活Cre重組酶，敲除目標(biāo)基因。
Cre小鼠和flox小鼠是基因功能研究的強(qiáng)大工具，通過(guò)Cre-loxP系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)條件性基因操作，廣泛應(yīng)用于組織特異性和時(shí)間特異性的基因功能研究、疾病模型構(gòu)建等領(lǐng)域。選擇合適的小鼠品系、設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)方案，是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的關(guān)鍵。
如果你對(duì)Cre小鼠和flox小鼠的應(yīng)用有更多疑問(wèn)，關(guān)注我們，獲取更多生物醫(yī)學(xué)研究的前沿資訊和實(shí)用技巧！
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主營(yíng)項(xiàng)目
1. 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
動(dòng)物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學(xué)檢測(cè)、心功能、無(wú)創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動(dòng)生化檢測(cè)等
2. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
CCK8/MTT、原代細(xì)胞分離、流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株
3. 分子生物學(xué)
PCR檢測(cè)、熒光定量PCR、絕對(duì)定量PCR、端粒酶長(zhǎng)度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測(cè)等
4. 蛋白實(shí)驗(yàn)
WB、Co-IP、酵母雙雜
5. 病理實(shí)驗(yàn)
HE染色、免疫組學(xué)、電鏡
6. 生理生化實(shí)驗(yàn)
肝腎功能、抗氧化、免疫反應(yīng)等生理免疫指標(biāo);動(dòng)植物營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)、微量元素、重金屬、酶活等。
7. 多組學(xué)實(shí)驗(yàn)
基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析
8. 整體課題實(shí)驗(yàn)
方案設(shè)計(jì)、整體實(shí)驗(yàn)交付、標(biāo)書(shū)寫(xiě)作、論文潤(rùn)色、協(xié)助投稿
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