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- 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)
- 動(dòng)物飼養(yǎng) 疾病造模 行為學(xué)檢測(cè) 心功能 無(wú)創(chuàng)血壓 血常規(guī) 全自動(dòng)生化檢測(cè)等
- 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)
- CCK8/MTT 原代細(xì)胞分離 流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞劃痕 侵襲 遷移 EDU染色 轉(zhuǎn)染 穩(wěn)定株篩選
動(dòng)物實(shí)驗(yàn) ▏糖尿病動(dòng)物模型構(gòu)建方法
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發(fā)表時(shí)間：2025-07-22
前言
糖尿病（Diabetes mellitus,DM）是胰島素抵抗和胰島素缺乏導(dǎo)致的以高血糖為主要特征的代謝絮亂綜合征，易發(fā)生心、腦、腎等并發(fā)癥，典型病例出現(xiàn)多尿、多飲、多食、消瘦等表現(xiàn)，即“三多一少”癥狀。其發(fā)病機(jī)理復(fù)雜，至今尚未完全闡明，目前還沒(méi)有根治方法，因此，建立和選擇適當(dāng)?shù)奶悄虿?dòng)物模型對(duì)于糖尿病致病因素的研究以及糖尿病藥物篩選、療效研究等十分重要。
一、自發(fā)性動(dòng)物模型
自發(fā)性糖尿病動(dòng)物模型是指動(dòng)物未經(jīng)過(guò)任何有意識(shí)的人工處置，在自然情況下發(fā)生糖尿病的動(dòng)物模型。該模型絕大多數(shù)采用有自發(fā)性糖尿病傾向的近交系純種動(dòng)物。
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自發(fā)性動(dòng)物模型可分為兩類(lèi)：
I型糖尿病模型（胰島素依賴(lài)型糖尿病）：BB大鼠、LETL大鼠、NOD小鼠。
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Ⅱ型糖尿病模型（非胰島素依賴(lài)型糖尿病）：KK小鼠、ob/ob小鼠和 db/db小鼠、ZDF大鼠、GK大鼠。
二、誘發(fā)性動(dòng)物模型
實(shí)驗(yàn)性糖尿病動(dòng)物模型是指通過(guò)物理、生物、化學(xué)等致病因素人工誘發(fā)出的具有糖尿病特征的動(dòng)物模型，具有耗時(shí)短、方法簡(jiǎn)便、易于掌握、重復(fù)性好的特點(diǎn)，短期內(nèi)可誘導(dǎo)出大量模型。（本文將舉例幾種常見(jiàn)方法）
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手術(shù)法：胰腺切除法是最早的糖尿病動(dòng)物模型復(fù)制方法（制成I型糖尿病模型）。胰腺切除后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)了多飲、多食、糖耐量降低等糖尿病癥狀，但是由于胰腺切除導(dǎo)致胰島素絕對(duì)缺乏，會(huì)引起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的高血糖癥及酮酸中毒甚至死亡，風(fēng)險(xiǎn)較高。
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飲食誘導(dǎo)法：飲食誘導(dǎo)法是一種比較簡(jiǎn)便的糖尿病誘導(dǎo)方法，一般利用高糖高脂飼料連續(xù)喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，糖在體內(nèi)直接可導(dǎo)致高血糖，在長(zhǎng)期高糖飲食誘導(dǎo)下引起糖代謝異常，繼而導(dǎo)致Ⅱ型糖尿病，此外高脂也會(huì)引起脂代謝異常，進(jìn)而導(dǎo)致Ⅱ型糖尿病。
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STZ（鏈脲佐菌素）誘導(dǎo)法：STZ全稱(chēng)鏈脲佐菌素，是目前使用最廣泛的糖尿病動(dòng)物模型誘導(dǎo)劑，是一種能夠使胰島β細(xì)胞產(chǎn)生毒素的抗菌素，其原理是通過(guò)產(chǎn)生自由基損傷胰島β細(xì)胞的功能，引起胰島素合成減少，從而誘發(fā)糖尿病。一般可以單次大劑量注射STZ或者多次小劑量注射STZ，以誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生糖尿病癥狀，另外有文獻(xiàn)報(bào)道，雄性動(dòng)物造模成功率顯著高于雌性動(dòng)物。
STZ破壞胰島β細(xì)胞原理圖
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飲食誘導(dǎo)聯(lián)合STZ誘導(dǎo)法：高脂高糖加鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)II型糖尿病模型，高糖高脂飲食能降低動(dòng)物對(duì)胰島素的敏感性，進(jìn)而誘發(fā)胰島素抵抗，在此基礎(chǔ)上注射小劑量STZ，能夠破壞部分的胰島β細(xì)胞，導(dǎo)致胰島素的分泌相對(duì)不足，使其更接近II型糖尿病模型。
8周齡的SD大鼠高熱量飼喂2個(gè)月后，用15-30mg/kg劑量一次性腹腔注射2%STZ溶液，可建立外周胰島素抵抗和胰島功能輕度受損的糖尿病動(dòng)物模型，與人Ⅱ型糖尿病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程相似，且STZ用量小，減少了對(duì)其他組織的損害。
高糖高脂飼料配方：66.5%普通飼料，20%蔗糖，10%豬油，2.5%膽固醇，1%膽酸鹽，配方來(lái)自《人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的復(fù)制》第2版。
注意：高脂高糖飲食的動(dòng)物非常容易死亡，尤其是在注射了STZ之后依然采用高質(zhì)高糖喂養(yǎng)；糖尿病動(dòng)物極易發(fā)生感染，動(dòng)物間的撕咬傷也不易愈合，由于動(dòng)物都是多尿，潮濕的飼養(yǎng)籠更容易出現(xiàn)問(wèn)題，記得勤換墊料。
正常大鼠（左）與肥胖糖尿病大鼠（右）對(duì)比
主營(yíng)項(xiàng)目
1. 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
動(dòng)物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學(xué)檢測(cè)、心功能、無(wú)創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動(dòng)生化檢測(cè)等
2. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
CCK8/MTT、原代細(xì)胞分離、流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株
3. 分子生物學(xué)
PCR檢測(cè)、熒光定量PCR、絕對(duì)定量PCR、端粒酶長(zhǎng)度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測(cè)等
4. 蛋白實(shí)驗(yàn)
WB、Co-IP、酵母雙雜
5. 病理實(shí)驗(yàn)
HE染色、免疫組學(xué)、電鏡
6. 生理生化實(shí)驗(yàn)
肝腎功能、抗氧化、免疫反應(yīng)等生理免疫指標(biāo);動(dòng)植物營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)、微量元素、重金屬、酶活等。
7. 多組學(xué)實(shí)驗(yàn)
基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析
8. 整體課題實(shí)驗(yàn)
方案設(shè)計(jì)、整體實(shí)驗(yàn)交付、標(biāo)書(shū)寫(xiě)作、論文潤(rùn)色、協(xié)助投稿
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