實驗背景
糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一類嚴重威脅人類身體健康的代謝性疾病。由于胰島素分泌缺陷或作用障礙引起機體慢性血糖水平增高,導致糖類、蛋白質、脂肪等的代謝紊亂,繼而引起腎臟、心臟等組織器官慢性損害。通過構建II型糖尿病(T2DM)動物模型,對研究T2DM的發生機理和臨床防治十分重要。
常見模型構建方法
01
高脂飼料誘導模型
通過喂養大鼠或小鼠高脂肪飲食,誘導胰島素抵抗和糖耐量異常,最終發展為Ⅱ型糖尿病
02
單一基因缺陷模型
通過基因工程手段,敲除或過表達與糖代謝相關的特定基因,如胰島素受體(IR)、葡萄糖轉運蛋白(GLUT)等
03
化學誘導模型
使用化學物質如鏈脲佐菌素(STZ)單獨或與其他化合物聯合使用,破壞胰島β細胞,導致胰島素分泌不足
04
復合誘導模型
結合高脂飲食和化學誘導劑(如STZ),模擬人類Ⅱ型糖尿病的病理生理特征
高脂飼料誘導模型造模
本實驗旨在通過高脂飼料誘導建立Ⅱ型糖尿病(T2DM)動物模型,以模擬人類T2DM的病理生理特征,為藥物研發和治療策略提供實驗依據
01
實驗動物選擇
SD大鼠,周齡6-8周,體重180-220g,健康雄性
02
實驗設備與儀器
STZ溶液、注射器、飼養籠、飲水瓶、飼料槽、體重秤、血糖儀等
03
實驗方法
1.動物適應性飼養
將大鼠在SPF級動物實驗室中適應性飼養7天,確保其適應新環境并排除潛在疾病
2. 高脂飼料喂養
自適應性飼養結束后,開始給予大鼠高脂飼料喂養,持續4周。期間密切觀察大鼠的飲食、活動及體重變化
3. 注射造模
在高脂飼料喂養的第4周,大鼠腹腔注射1%STZ溶液,劑量為30mg/kg(3ml/kg),連續3天同一時間注射。STZ可選擇性破壞胰島β細胞,導致胰島素分泌不足
4. 造模后護理
注射完成后,降低飼養密度以減少應激反應,每天更換新鮮飲用水,保證充足的水分攝入,及時補充飼料,維持良好的營養狀態,提高墊料更換頻率,保持環境清潔干燥,若進行注射、采血、手術等侵入性操作,務必嚴格遵守無菌原則,確保操作前后嚴格消毒
5. 模型評價
在造模完成后的一段時間內(通常為數周至數月),定期檢測大鼠的空腹血糖、餐后血糖、胰島素水平等指標,以評估模型的成功與否及病情進展
注意事項
①實驗過程中需嚴格遵守動物福利和倫理原則,盡量減輕動物的痛苦和不適
②在數據分析時應充分考慮模型的局限性,并結合其他研究手段綜合判斷
③及時記錄實驗過程中的所有數據,以便后續分析和總結經驗教訓
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主營項目
1. 動物實驗
動物飼養、疾病造模、行為學檢測、心功能、無創血壓、血常規、全自動生化檢測等
2. 細胞實驗
CCK8/MTT、原代細胞分離、流式細胞實驗、細胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉染、穩定株
3. 分子生物學
PCR檢測、熒光定量PCR、絕對定量PCR、端粒酶長度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測等
4. 蛋白實驗
WB、Co-IP、酵母雙雜
5. 病理實驗
HE染色、免疫組學、電鏡
6. 生理生化實驗
肝腎功能、抗氧化、免疫反應等生理免疫指標;動植物營養指標、微量元素、重金屬、酶活等。
7. 多組學實驗
基因組、轉錄調控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析
8. 整體課題實驗
方案設計、整體實驗交付、標書寫作、論文潤色、協助投稿
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康旭禾生物提供包括動物實驗、細胞實驗、分子實驗、病理實驗、流式檢測實驗及論文翻譯、潤色、投稿輔助等相關的各項服務。
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