實(shí)驗(yàn)背景
糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一類嚴(yán)重威脅人類身體健康的代謝性疾病。由于胰島素分泌缺陷或作用障礙引起機(jī)體慢性血糖水平增高,導(dǎo)致糖類、蛋白質(zhì)、脂肪等的代謝紊亂,繼而引起腎臟、心臟等組織器官慢性損害。通過構(gòu)建II型糖尿病(T2DM)動物模型,對研究T2DM的發(fā)生機(jī)理和臨床防治十分重要。
常見模型構(gòu)建方法
01
高脂飼料誘導(dǎo)模型
通過喂養(yǎng)大鼠或小鼠高脂肪飲食,誘導(dǎo)胰島素抵抗和糖耐量異常,最終發(fā)展為Ⅱ型糖尿病
02
單一基因缺陷模型
通過基因工程手段,敲除或過表達(dá)與糖代謝相關(guān)的特定基因,如胰島素受體(IR)、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(GLUT)等
03
化學(xué)誘導(dǎo)模型
使用化學(xué)物質(zhì)如鏈脲佐菌素(STZ)單獨(dú)或與其他化合物聯(lián)合使用,破壞胰島β細(xì)胞,導(dǎo)致胰島素分泌不足
04
復(fù)合誘導(dǎo)模型
結(jié)合高脂飲食和化學(xué)誘導(dǎo)劑(如STZ),模擬人類Ⅱ型糖尿病的病理生理特征
高脂飼料誘導(dǎo)模型造模
本實(shí)驗(yàn)旨在通過高脂飼料誘導(dǎo)建立Ⅱ型糖尿病(T2DM)動物模型,以模擬人類T2DM的病理生理特征,為藥物研發(fā)和治療策略提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)
01
實(shí)驗(yàn)動物選擇
SD大鼠,周齡6-8周,體重180-220g,健康雄性
02
實(shí)驗(yàn)設(shè)備與儀器
STZ溶液、注射器、飼養(yǎng)籠、飲水瓶、飼料槽、體重秤、血糖儀等
03
實(shí)驗(yàn)方法
1.動物適應(yīng)性飼養(yǎng)
將大鼠在SPF級動物實(shí)驗(yàn)室中適應(yīng)性飼養(yǎng)7天,確保其適應(yīng)新環(huán)境并排除潛在疾病
2. 高脂飼料喂養(yǎng)
自適應(yīng)性飼養(yǎng)結(jié)束后,開始給予大鼠高脂飼料喂養(yǎng),持續(xù)4周。期間密切觀察大鼠的飲食、活動及體重變化
3. 注射造模
在高脂飼料喂養(yǎng)的第4周,大鼠腹腔注射1%STZ溶液,劑量為30mg/kg(3ml/kg),連續(xù)3天同一時間注射。STZ可選擇性破壞胰島β細(xì)胞,導(dǎo)致胰島素分泌不足
4. 造模后護(hù)理
注射完成后,降低飼養(yǎng)密度以減少應(yīng)激反應(yīng),每天更換新鮮飲用水,保證充足的水分?jǐn)z入,及時補(bǔ)充飼料,維持良好的營養(yǎng)狀態(tài),提高墊料更換頻率,保持環(huán)境清潔干燥,若進(jìn)行注射、采血、手術(shù)等侵入性操作,務(wù)必嚴(yán)格遵守?zé)o菌原則,確保操作前后嚴(yán)格消毒
5. 模型評價
在造模完成后的一段時間內(nèi)(通常為數(shù)周至數(shù)月),定期檢測大鼠的空腹血糖、餐后血糖、胰島素水平等指標(biāo),以評估模型的成功與否及病情進(jìn)展
注意事項(xiàng)
①實(shí)驗(yàn)過程中需嚴(yán)格遵守動物福利和倫理原則,盡量減輕動物的痛苦和不適
②在數(shù)據(jù)分析時應(yīng)充分考慮模型的局限性,并結(jié)合其他研究手段綜合判斷
③及時記錄實(shí)驗(yàn)過程中的所有數(shù)據(jù),以便后續(xù)分析和總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)
如有需要,請聯(lián)系我們~
主營項(xiàng)目
1. 動物實(shí)驗(yàn)
動物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學(xué)檢測、心功能、無創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動生化檢測等
2. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
CCK8/MTT、原代細(xì)胞分離、流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株
3. 分子生物學(xué)
PCR檢測、熒光定量PCR、絕對定量PCR、端粒酶長度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測等
4. 蛋白實(shí)驗(yàn)
WB、Co-IP、酵母雙雜
5. 病理實(shí)驗(yàn)
HE染色、免疫組學(xué)、電鏡
6. 生理生化實(shí)驗(yàn)
肝腎功能、抗氧化、免疫反應(yīng)等生理免疫指標(biāo);動植物營養(yǎng)指標(biāo)、微量元素、重金屬、酶活等。
7. 多組學(xué)實(shí)驗(yàn)
基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析
8. 整體課題實(shí)驗(yàn)
方案設(shè)計、整體實(shí)驗(yàn)交付、標(biāo)書寫作、論文潤色、協(xié)助投稿
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