動物實(shí)驗 ▏小鼠T淋巴細(xì)胞 CTLL-2 培養(yǎng)攻略
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發(fā)表時間：2025-08-26
小鼠T淋巴細(xì)胞 CTLL-2
細(xì)胞名稱：CTLL-2
中文名稱：小鼠T淋巴細(xì)胞
種屬來源：小鼠
組織來源：T細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
生長特性：懸浮生長
培養(yǎng)條件：
氣相：95%空氣，5%二氧化碳
溫度：37℃
培養(yǎng)基與添加物：
基礎(chǔ)培養(yǎng)基：RPMI-1640
添加物：10%特級胎牛血清（FBS）、100U/ml（或100IU/ml）IL-2、1%青霉素/鏈霉素（P/S）
注意，有些培養(yǎng)體系可能略有不同，但核心成分通常包括RPMI-1640、FBS和IL-2。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1. 細(xì)胞復(fù)蘇
①從液氮罐或-80℃冰箱中取出凍存管，迅速放入37℃水浴中搖晃解凍。
②將解凍后的細(xì)胞懸液移至含5ml完全培養(yǎng)基的離心管中，1000rpm離心5min。
③棄去上清液，補(bǔ)加5mL完全培養(yǎng)基后吹勻，接種于T25培養(yǎng)瓶中（或6cm皿中），培養(yǎng)過夜。
④第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2. 細(xì)胞傳代
①當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時，進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
②離心收集細(xì)胞（1000rpm，5-8min），棄去上清液。
③補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6mL完全培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶中或6cm培養(yǎng)皿中。
④對于較難培養(yǎng)的細(xì)胞或新手，可采用豎瓶培養(yǎng)法，逐步補(bǔ)加完全培養(yǎng)基，待細(xì)胞密度升高后再進(jìn)行傳代。
3. 細(xì)胞凍存
①選擇生長狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行凍存。
②離心收集細(xì)胞（1000rpm，5-8min），去除上清液。
③按凍存數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，輕輕混勻后，分裝入凍存管中（每管約1mL細(xì)胞懸液）。
④將凍存管放入-80℃冰箱中過夜，然后轉(zhuǎn)入液氮罐中儲存。
培養(yǎng)注意事項
1.細(xì)胞接收與檢查：收到細(xì)胞后，首先檢查細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有異常，請及時與我司（恒遠(yuǎn)生物）聯(lián)系。
2.無菌操作：在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程，避免細(xì)胞污染。
3.細(xì)胞密度監(jiān)控：定期觀察細(xì)胞生長情況，及時傳代以避免細(xì)胞密度過高導(dǎo)致死亡。
4.培養(yǎng)基更換：根據(jù)細(xì)胞生長情況和培養(yǎng)基顏色變化，適時更換新鮮培養(yǎng)基。
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1. 動物實(shí)驗
動物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學(xué)檢測、心功能、無創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動生化檢測等
2. 細(xì)胞實(shí)驗
CCK8/MTT、原代細(xì)胞分離、流式細(xì)胞實(shí)驗、細(xì)胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株
3. 分子生物學(xué)
PCR檢測、熒光定量PCR、絕對定量PCR、端粒酶長度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測等
4. 蛋白實(shí)驗
WB、Co-IP、酵母雙雜
5. 病理實(shí)驗
HE染色、免疫組學(xué)、電鏡
6. 生理生化實(shí)驗
肝腎功能、抗氧化、免疫反應(yīng)等生理免疫指標(biāo);動植物營養(yǎng)指標(biāo)、微量元素、重金屬、酶活等。
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基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析
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