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- 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)
- 動(dòng)物飼養(yǎng) 疾病造模 行為學(xué)檢測(cè) 心功能 無(wú)創(chuàng)血壓 血常規(guī) 全自動(dòng)生化檢測(cè)等
- 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)
- CCK8/MTT 原代細(xì)胞分離 流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞劃痕 侵襲 遷移 EDU染色 轉(zhuǎn)染 穩(wěn)定株篩選
【國(guó)自然熱點(diǎn)推薦】巨噬細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)現(xiàn)狀+機(jī)制+實(shí)驗(yàn) | 一文統(tǒng)統(tǒng)搞定！
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發(fā)表時(shí)間：2025-09-04
巨噬細(xì)胞極化、巨噬細(xì)胞鐵死亡、巨噬細(xì)胞代謝重編程、巨噬細(xì)胞吞噬、巨噬細(xì)胞遷移……小編想一定是這些研究熱點(diǎn)的堆積，才一步步把巨噬細(xì)胞送上“國(guó)自然榜一”的地位~
在這些研究熱點(diǎn)中，有一個(gè)隱藏頗深的熱點(diǎn)可能很多小伙伴們還沒(méi)發(fā)現(xiàn)，今天小編把它揪出來(lái)“公之于眾”，讓更多小伙伴們知道，巨噬細(xì)胞竟還會(huì)“布下天羅地網(wǎng)”！
噔~噔~噔~今天的重磅推薦——巨噬細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)（Macrophage Extracellular Traps，METs）來(lái)啦！
巨噬細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)——研究現(xiàn)狀
深知大家時(shí)間寶貴，小編直接給小伙伴們上一些實(shí)實(shí)在在的內(nèi)容~
METs相關(guān)獲批國(guó)自然中標(biāo)項(xiàng)目
追溯METs研究國(guó)自然獲批項(xiàng)目歷程發(fā)現(xiàn)，METs從2015年開(kāi)始走進(jìn)國(guó)自然，到2023年METs相關(guān)獲批國(guó)自然項(xiàng)目共計(jì)14項(xiàng)，其中僅1項(xiàng)關(guān)于鼠傷寒沙門菌的研究項(xiàng)目獲批于2015年，其余13項(xiàng)均獲批于2019-2023年（詳見(jiàn)圖1）。小編著實(shí)沒(méi)想到項(xiàng)目數(shù)量雖還不多，但涉及的疾病類型還挺廣泛，其中包括腫瘤、肝臟缺血再灌注、肺損傷、腎間質(zhì)纖維化、衰老相關(guān)脂肪組織代謝等等。
METs相關(guān)文獻(xiàn)發(fā)表
目前在Pubmed上以“Macrophage Extracellular Traps METs”為關(guān)鍵詞進(jìn)行搜索，獲得的文獻(xiàn)數(shù)目尚少，僅百十來(lái)篇。文章雖然少，小編瀏覽后發(fā)現(xiàn)內(nèi)有乾坤，不信您接著往下看！
?《Immunity》文章
● 題目：膀胱黏膜下血管周圍巨噬細(xì)胞構(gòu)成的膀胱-血液免疫屏障可以抑制尿路病原體的播散
● 主要研究?jī)?nèi)容：
（1）通過(guò)單細(xì)胞RNA測(cè)序和流式細(xì)胞術(shù)鑒定，發(fā)現(xiàn)了定位于膀胱黏膜上皮下方、緊附于血管壁外側(cè)的CX3CR1hi巨噬細(xì)胞新亞群，將之命名為suPVM（suburothelial perivascular macrophage）；
（2）suPVM可以預(yù)防急性膀胱炎導(dǎo)致的菌血癥和尿路致病性大腸桿菌（UPEC）的全身擴(kuò)散；
（3）suPVM利用METs將UPEC隔離在尿路上皮內(nèi)，有效的限制了細(xì)菌到達(dá)富含血管的固有層和血液中；
（4）除隔絕細(xì)菌外，METs相關(guān)蛋白MMP13還可以促進(jìn)中性粒細(xì)胞向尿路上皮遷移。
《Nature communications》文章
● 題目：程序性壞死增強(qiáng)“不要吃我”信號(hào)，誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞胞外誘捕促進(jìn)胰腺癌肝轉(zhuǎn)移
● 主要研究?jī)?nèi)容：見(jiàn)圖3。
?《Journal of Hazardous Materials》文章
● 題目：聚苯乙烯微塑料通過(guò)誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)的形成促進(jìn)肝臟炎癥
● 主要研究?jī)?nèi)容：
（1）聚苯乙烯微塑料（PS-MPs）誘導(dǎo)肝臟炎癥以及METs的形成；
（2）巨噬細(xì)胞在暴露于PS-MPs后被激活，破壞線粒體動(dòng)力學(xué)穩(wěn)態(tài)，從而進(jìn)一步激活線粒體自噬和溶酶體，最終導(dǎo)致溶酶體破裂和鈣離子釋放，誘導(dǎo)METs形成；
（3）阻斷活性氧途徑或自噬途徑可以部分緩解PS-MPs誘導(dǎo)的線粒體和溶酶體損傷，抑制METs形成。
巨噬細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)——機(jī)制探索
從上述研究進(jìn)展來(lái)看，METs可謂是進(jìn)退得當(dāng)，既能在高水平文章中“扛大旗”，也能在其他研究熱點(diǎn)旁“當(dāng)綠葉”。那接下來(lái)我們就系統(tǒng)了解下，METs到底是什么？它和中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)（NETs）又有何不同？
METs的組成
METs的組成成分與NETs相似，主要由染色質(zhì)、組蛋白和抗菌蛋白組成，據(jù)報(bào)道具體蛋白包括髓過(guò)氧化物酶（MPO）、基質(zhì)金屬蛋白酶12（MMP12）、溶菌酶、中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶和乳鐵蛋白等。
與NETs組成不同的是，METs的染色質(zhì)骨架長(zhǎng)度/來(lái)源以及蛋白質(zhì)種類等與NETs存在差異，這些差異可能導(dǎo)致METs的抗菌能力低于NETs。
METs的激活及釋放
METs的激活物主要包括以下兩大類物質(zhì)：一類是化學(xué)物質(zhì)刺激，另一類是病原微生物刺激。
?化學(xué)物質(zhì)刺激主要由一些促炎因子組成，這表明METs的釋放發(fā)生在炎癥部位。
?病原微生物刺激主要包括革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽(yáng)性菌、各種寄生蟲、真菌、抗酸桿菌以及益生菌等。
METs的激活物
METs的相關(guān)機(jī)制
目前根據(jù)不同作用機(jī)制將NETosis分類為自殺型NETosis（細(xì)胞膜解體，細(xì)胞死亡釋放染色質(zhì)）和活力型NETosis（細(xì)胞非裂解釋放染色質(zhì)）。雖然METs相關(guān)研究較少，但已有蛛絲馬跡可以證實(shí)METs釋放DNA的速率在不同刺激下也存在差異，由此推斷METs和NETs作用機(jī)制類似。
此外，目前還發(fā)現(xiàn)了以下關(guān)鍵機(jī)制，這些機(jī)制可能是您的課題關(guān)聯(lián)METs很好的切入點(diǎn)哦~
? M1型巨噬細(xì)胞更傾向于釋放METs
比如您研究的疾病涉及到M1型巨噬細(xì)胞，那不妨去檢測(cè)是否存在METs。
?活性氧和Ca2+離子內(nèi)流是METs的關(guān)鍵觸發(fā)因素
比如您研究的疾病涉及ROS的產(chǎn)生和Ca2+離子內(nèi)流，那下游機(jī)制也可以考慮METs。
?組蛋白瓜氨酸化與METs釋放相關(guān)，其中涉及PAD2或PAD4的激活
比如您研究的疾病涉及組蛋白瓜氨酸化、PAD2或PAD4異常表達(dá)激活，下游探討METs也許是個(gè)不錯(cuò)的選擇。
圖7 METosis作用機(jī)制示意圖
（圖片來(lái)源：PMID_35191493）
巨噬細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)——落地實(shí)驗(yàn)
看到這里的小伙伴們可能真的對(duì)METs心動(dòng)了，接下來(lái)小編為大家整理一些關(guān)于METs的落地基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，總不能讓各位小伙伴空手離開(kāi)吧，干貨來(lái)嘍~
由于METs的組成與NETs類似，所以二者檢測(cè)手段也基本一致，實(shí)際上主要是檢測(cè)DNA骨架和其中鑲嵌的組蛋白、MPO以及MMP12等蛋白......
電鏡觀察
鑒定METs的金標(biāo)準(zhǔn)，利用掃描電子顯微鏡直接觀察源自巨噬細(xì)胞的胞外誘捕網(wǎng)結(jié)構(gòu)。
METs染色觀察
利用免疫組織化學(xué)或免疫熒光染色對(duì)METs進(jìn)行染色和標(biāo)記，通過(guò)激光共聚焦顯微鏡和熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。如下圖，SYTOX Green（綠色）是死細(xì)胞核酸染料，可輕易穿過(guò)受損細(xì)胞膜而不能透過(guò)活細(xì)胞膜；Hoechest（藍(lán)色）是膜通透性的熒光染料，主要用于活細(xì)胞標(biāo)記。
METs組成蛋白的定量分析
利用免疫組織化學(xué)、免疫熒光染色、Western Blot檢測(cè)citH3、MPO等蛋白的表達(dá)以及與巨噬細(xì)胞標(biāo)志蛋白F4/80共定位情況。
細(xì)胞外釋放DNA濃度檢測(cè)
利用PicoGreen試劑檢測(cè)細(xì)胞外釋放的DNA濃度；定量SYTOX Green染色結(jié)果等。
DNaseI的應(yīng)用
DNaseI是一種核酸酶，可以降解DNA，從而影響METs的形成。因此，DNaseI常被用于抑制METs的形成，以研究METs在疾病模型中的作用效果。
主營(yíng)項(xiàng)目
1. 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
動(dòng)物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學(xué)檢測(cè)、心功能、無(wú)創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動(dòng)生化檢測(cè)等
2. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
CCK8/MTT、原代細(xì)胞分離、流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株
3. 分子生物學(xué)
PCR檢測(cè)、熒光定量PCR、絕對(duì)定量PCR、端粒酶長(zhǎng)度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測(cè)等
4. 蛋白實(shí)驗(yàn)
WB、Co-IP、酵母雙雜
5. 病理實(shí)驗(yàn)
HE染色、免疫組學(xué)、電鏡
6. 生理生化實(shí)驗(yàn)
肝腎功能、抗氧化、免疫反應(yīng)等生理免疫指標(biāo);動(dòng)植物營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)、微量元素、重金屬、酶活等。
7. 多組學(xué)實(shí)驗(yàn)
基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析
8. 整體課題實(shí)驗(yàn)
方案設(shè)計(jì)、整體實(shí)驗(yàn)交付、標(biāo)書寫作、論文潤(rùn)色、協(xié)助投稿
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