細(xì)胞劃痕實驗步驟及注意事項
細(xì)胞劃痕(Wound Healing)是一種操作簡單,經(jīng)濟(jì)實惠的研究細(xì)胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。其實驗原理是,當(dāng)細(xì)胞長到融合成單層狀態(tài)時,在融合的單層細(xì)胞上人為一個空白區(qū)域,稱為“劃痕”。劃痕邊緣的細(xì)胞會逐漸進(jìn)入空白區(qū)域使“劃痕”愈合。在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞上,用微量頭或其他硬物在細(xì)胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線,去除中央的細(xì)胞,然后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至設(shè)定時間(采用無血清或低血清(<2%)排除細(xì)胞增殖的影響),取出培養(yǎng)板,觀察周邊細(xì)胞是否生長(修復(fù))至中央…