LB培養基(Luria-Bertani培養基,也稱為Lysogeny Broth)是一種廣泛應用于微生物學和分子生物學實驗室的液體或固體培養基,主要用于培養大腸桿菌(*Escherichia coli*)等細菌。它的配方簡單、營養豐富,能夠支持多種細菌的快速生長。
No.1主要成分
LB培養基的經典配方包含以下三種核心成分:
1. 胰蛋白胨(Tryptone):10 g/L 提供氮源、氨基酸和小肽,是細菌生長的主要營養來源。
2. 酵母提取物(Yeast Extract):5 g/L 提供維生素、核苷酸和其他生長因子。
3. 氯化鈉(NaCl):10 g/L 維持滲透壓平衡,促進細菌細胞膜的穩定性。
No.2其他可能的調整
●配制固體培養基時,需添加**瓊脂(Agar)(通常15-20 g/L)。
●某些配方會調整NaCl濃度(如LB-Miller培養基含10 g/L,而LB-Lennox含5 g/L),以適應不同實驗需求。
No.3配制方法
1. 將上述成分溶解于去離子水中。
2. 調節pH至中性(約7.0-7.4)。
3. 高溫高壓滅菌(121°C,15-20分鐘)。
4. 冷卻后根據需要倒入培養皿(固體培養基)或分裝至試管(液體培養基)。
No.4主要用途
1. 細菌擴增:用于大腸桿菌的常規培養、質粒提取或蛋白表達。
2. 克隆實驗:在分子克隆中篩選轉化后的細菌。
3. 抗生素篩選:通過添加抗生素(如氨芐青霉素、卡那霉素)篩選攜帶抗性基因的菌株。
4. 基礎研究:適用于基因編輯、代謝分析等基礎實驗。
No.5優缺點
優點:成本低、配制簡單、適用性廣,適合快速培養非營養缺陷型細菌。
缺點:營養過于豐富,可能導致部分細菌代謝過快(如產生過量乙酸),影響長時間培養或高密度發酵。
No.6注意事項
1. 滅菌后若發現渾濁或沉淀,可能被污染,需重新配制。
2. 固體培養基需趁熱倒板,避免瓊脂凝固。
3. 若用于篩選抗生素抗性菌株,需在培養基冷卻至約50°C時加入抗生素,避免高溫破壞藥物活性。
No.7名稱來源
“LB”源于發明者薩爾瓦多·盧里亞(Salvador Luria)和朱塞佩·貝爾塔尼(Giuseppe Bertani),最初用于研究λ噬菌體的溶原性(lysogeny),因此也被稱為“Lysogeny Broth”。
主營項目
1. 動物實驗
動物飼養、疾病造模、行為學檢測、心功能、無創血壓、血常規、全自動生化檢測等
2. 細胞實驗
CCK8/MTT、原代細胞分離、流式細胞實驗、細胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉染、穩定株
3. 分子生物學
PCR檢測、熒光定量PCR、絕對定量PCR、端粒酶長度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測等
4. 蛋白實驗
WB、Co-IP、酵母雙雜
5. 病理實驗
HE染色、免疫組學、電鏡
6. 生理生化實驗
肝腎功能、抗氧化、免疫反應等生理免疫指標;動植物營養指標、微量元素、重金屬、酶活等。
7. 多組學實驗
基因組、轉錄調控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析
8. 整體課題實驗
方案設計、整體實驗交付、標書寫作、論文潤色、協助投稿
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