動(dòng)物疾病模型主要用于實(shí)驗(yàn)生理學(xué)、實(shí)驗(yàn)病理學(xué)和實(shí)驗(yàn)治療學(xué)(包括新藥篩選)研究。人類疾病的發(fā)展十分復(fù)雜,臨床積累的經(jīng)驗(yàn)不僅在時(shí)間和空間上都存在局限性,而且在方法和道義上也受到限制。借助于動(dòng)物模型的間接研究,可以有意識(shí)地改變那些在自然條件下不可能或不易排除的因素,以便更準(zhǔn)確地觀察模型的實(shí)驗(yàn)結(jié)果并與人類疾病進(jìn)行比較研究,有助于更方便,更有效地認(rèn)識(shí)人類疾病的發(fā)生發(fā)展規(guī)律,研究防治措施。
1.方案設(shè)計(jì)
01
常用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)選擇
1. 名 稱:KM 小鼠
主要用途:廣泛應(yīng)用于藥理學(xué)、毒理學(xué)等領(lǐng)域研究以及藥品、生物制品的生產(chǎn)與檢定。
簡(jiǎn) 介:1926年美國Rockfeller研究所從瑞士引入白化小鼠培育成Swiss小鼠。1944年3月17日由湯飛凡教授從印度Hoffkine研究所引進(jìn)Swiss小鼠,飼養(yǎng)在昆明中央防疫處。由于該小鼠起初引入地是昆明,故稱之為昆明小鼠。解放后中央防疫處遷回北京天壇,更名為衛(wèi)生部生物制品研究所。1950年小鼠隨之引到北京天壇(檢定所現(xiàn)址),當(dāng)時(shí)保種9對(duì)。1953年10月移至北京東郊,1954年擴(kuò)種,相繼引到其他單位,現(xiàn)已遍布全國各地。
特 點(diǎn):遠(yuǎn)交系小鼠,經(jīng)50多年的選育,現(xiàn)在KM小鼠腫瘤自發(fā)率極低。不同地飼養(yǎng)的昆明小鼠封閉群的生長發(fā)育與繁殖性能存在一定差異。但其共同特點(diǎn)是抗病力和適應(yīng)力很強(qiáng),繁殖率和成活率高。它在我國生物醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中約為小鼠總用量的70%。
2. 名 稱:ICR小鼠
主要用途:已選為某些生物制品檢定的法規(guī)動(dòng)物。廣泛用于藥理、毒理、腫瘤、放射性、食品、生物制品等的科研、生產(chǎn)和教學(xué)。
簡(jiǎn) 介:中國科學(xué)院遺傳研究所在1973年從日本國立腫瘤研究所引進(jìn);1979中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院分院動(dòng)物中心引進(jìn);1978年北京檢定所引進(jìn);1983年上海計(jì)劃生育研究所從瑞士蘇黎世毒理學(xué)研究所引進(jìn)。
特 點(diǎn):遠(yuǎn)交系小鼠,毛色白化。適應(yīng)性強(qiáng),體格健壯,繁殖力強(qiáng),生長速度快,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性較好,雌鼠自發(fā)性畸胎瘤和管狀腺瘤發(fā)病率為0%~1%,用氨基甲酸乙酯誘發(fā)時(shí),11~16天胚胎期畸胎瘤和管狀腺瘤發(fā)病率為5.9%,離乳個(gè)體管狀腺瘤和囊瘤發(fā)生率為30%,孕鼠為3%。是國際通用的封閉群小鼠, 我國從美國、日本、英國、瑞士等國引進(jìn)的ICR,各群體之間在遺傳特性方面不可避免地出現(xiàn)了一些差異,在應(yīng)用時(shí)應(yīng)注意。ICR/JCL小鼠是進(jìn)行免疫藥物篩選,復(fù)制病理模型較常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。外周血象和骨髓細(xì)胞,具有較好的穩(wěn)定性,是良好的血液學(xué)實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物。
3. 名 稱:C57BL/6J小鼠
主要用途:常被認(rèn)作“標(biāo)準(zhǔn)”的近交系,為許多突變基因提供遺傳背景。是腫瘤學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)研究中常用的品系。
簡(jiǎn) 介:1921年立特(Little)用艾比·拉特洛坡(Abby Lathrop)的小鼠株,雌鼠57號(hào)與雄鼠52號(hào)交配而得C57BL1937年從C57BL分離出C57BL/6和C57BL/10兩個(gè)亞系。1985 年從Olac引到中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所。
特 點(diǎn):近交系小鼠,毛色黑色;補(bǔ)體活性高;較易誘發(fā)免疫耐受性;對(duì)結(jié)核桿菌敏感;干擾素產(chǎn)量高。是腫瘤學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)研究常用的品系。乳腺腫瘤自然發(fā)生率低,化學(xué)物質(zhì)難以誘發(fā)乳腺和卵巢腫瘤。12%有眼睛缺損;雌仔鼠16.8%,雄仔鼠3%為小眼或無眼。用可的松可誘發(fā)腭裂,其發(fā)生率達(dá)20%。對(duì)放射物質(zhì)耐受力中等;補(bǔ)體活性高;較易誘發(fā)免疫耐受性。對(duì)結(jié)核桿菌敏感。對(duì)鼠痘病毒有一定抵抗力。干擾素產(chǎn)量較高。嗜酒 精性高,腎上腺素類脂質(zhì)濃度低。對(duì)百日咳組織胺易感因子敏感。
4. 名 稱:BALB/c小鼠
主要用途:廣泛地應(yīng)用于腫瘤學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、核醫(yī)學(xué)研究,以及單克隆抗體的制備等。但對(duì)致癌因子敏感。肺癌發(fā)病率雌性26%,雄性29%。對(duì)放射性照射極為敏感。廣泛應(yīng)用于腫瘤學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、核醫(yī)學(xué)和單克隆抗體等研究中。
簡(jiǎn) 介:1913年,貝格(Bagg)從美國商人歐希爾(Ohio)處購得的白化小鼠原種,以群內(nèi)方法繁殖。麥克·多威爾(MacDowell)在1923年開始作近交系培育,至1932年達(dá)26代,命名為BALB/c品系。安德爾文特(Andervont)等人使BALB/c廣為傳播和應(yīng)用。1985年我國從美國NIH引進(jìn)到中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所,為BALB/c第180代。
特 點(diǎn):乳腺腫瘤自然發(fā)生率低,但用乳腺腫瘤病毒誘發(fā)時(shí)發(fā)病率高;卵巢、腎上腺和肺的腫瘤在該小鼠有一定的發(fā)生率。易患慢性肺炎。對(duì)放射線甚為敏 感。與其他近交系相比,肝、脾與體重的比值較大。20月齡的雄鼠脾臟有淀粉樣變。有自發(fā)高血壓癥,老年鼠心臟有病變,雌雄鼠均有動(dòng)脈硬化。對(duì)鼠傷寒 沙門氏菌補(bǔ)體敏感,對(duì)麻疹病毒中度敏感。對(duì)利什曼原蟲屬、立克次氏體和百日咳組織胺易感因子敏感。
5. 名 稱:BALB/c-nu裸鼠
主要用途:廣泛應(yīng)用于腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、毒理學(xué)等基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的研究。
簡(jiǎn) 介:1973年丹麥的C.W.Friis在BALB/cA近交系小鼠中發(fā)現(xiàn)自發(fā)性突變的無毛小鼠,該突變小鼠胸腺發(fā)育不良,免疫T細(xì)胞缺失,而培育成了BALB/cA-nu。
特 點(diǎn):無毛、裸體、無胸腺。隨著年齡增長,皮膚逐漸變薄、頭頸部皮膚出現(xiàn)皺折、生長發(fā)育遲緩。由于無胸腺而僅有胸腺殘跡或異常胸腺上皮(該上皮不能使T細(xì)胞正常分化),導(dǎo)致缺乏成熟的T淋巴細(xì)胞,因而細(xì)胞免疫功能低下。但6~8周齡裸小鼠的NK細(xì)胞活性高于一般小鼠。B淋巴細(xì)胞正常,但其免疫功能欠佳。表現(xiàn)在B淋巴細(xì)胞分泌的免疫球蛋白以lgM為主,僅含少量的IgG。抵抗力差,容易患病毒性肝炎和肺炎。因此必須飼養(yǎng)在屏障系統(tǒng)中。為了提高繁殖率和存活率,一般采用純合型雄鼠與雜合型雌鼠交配的繁殖方式,可以獲得1/2純合型仔鼠。常用裸小鼠品系:BALB/c-nu、NIH-nu、NC-nu Swiss-nu、03H-nu、C57BL-nu等。
6. 名 稱:WISTAR大鼠
主要用途:多用于腫瘤、免疫、藥理、內(nèi)分泌。
簡(jiǎn) 介:1907年由美國維斯塔爾(Wistar)研究所育成,現(xiàn)己遍及世界各國的實(shí)驗(yàn)室。我國從日本及前蘇聯(lián)引進(jìn),是引進(jìn)最早、使用最廣泛、數(shù)量最多的大鼠品系之一。
特 點(diǎn):遠(yuǎn)交系大鼠,頭部較寬、耳朵較長、尾的長度小于身長。性周期穩(wěn)定,繁殖力強(qiáng),產(chǎn)仔多,平均每胎產(chǎn)仔在10只左右,生長發(fā)育快。10周齡時(shí)雄鼠體重可達(dá) 280~300g,雌鼠達(dá)170-260g。性情溫順。對(duì)傳染病的抵抗力較強(qiáng)。自發(fā)性腫瘤發(fā)生率低。目前各地飼養(yǎng)的Wistar大鼠的遺傳狀況差異較大。
7. 名 稱:SD(SpragueDawley)大鼠
主要用途:廣泛用于藥理、毒理、藥效及GLP實(shí)驗(yàn),營養(yǎng)學(xué)及內(nèi)分泌系統(tǒng)的研究。
簡(jiǎn) 介:1925年,美國斯?jié)娎鄹瘛6嗬?SpragueDawley)農(nóng)場(chǎng)用Wistar大鼠培育而成。生長快,繁育性能好,大多用于安全性試驗(yàn)及營養(yǎng)與生長發(fā)育有關(guān)的研究。
特 點(diǎn):頭部狹長、尾長接近于身長,產(chǎn)仔多,生長發(fā)育較Wistar為快。10周齡時(shí)雄鼠體重可達(dá)300~400g,雌鼠達(dá)180~270g。性情比Wistar大鼠稍為兇猛。對(duì)疾病的抵抗力較強(qiáng),尤其對(duì)呼吸道疾病的抵抗力很強(qiáng)。自發(fā)性腫瘤的發(fā)生率較低。對(duì)性激素敏感性高。
02
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則
1. 隨機(jī)原則
即運(yùn)用“隨機(jī)數(shù)字表”實(shí)現(xiàn)隨機(jī)化;運(yùn)用“隨機(jī)排列表”實(shí)現(xiàn)隨機(jī)化;運(yùn)用計(jì)算機(jī)產(chǎn)生“偽隨機(jī)數(shù)”實(shí)現(xiàn)隨機(jī)化。盡量運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)知識(shí)來設(shè)計(jì)自己的實(shí)驗(yàn),減少外在因素和人為因素的干擾。
2. 對(duì)照原則
空白對(duì)照組的設(shè)立——只有通過對(duì)照的設(shè)立我們才能清楚地看出實(shí)驗(yàn)因素在當(dāng)中所起的作用。當(dāng)某些處理本身夾雜著重要的非處理因素時(shí),還需設(shè)立僅含該非處理因素的實(shí)驗(yàn)組為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組;歷史或中外對(duì)照組的設(shè)立一一這種對(duì)照形式應(yīng)慎用,其對(duì)比的結(jié)果僅供參考,不能作為推理的依據(jù);多種對(duì)照形式同時(shí)并存。
3. 重復(fù)原則
所謂重復(fù)原則,就是在相同實(shí)驗(yàn)條件下必須做多次獨(dú)立重復(fù)實(shí)驗(yàn)。一般認(rèn)為重復(fù)3次以上的實(shí)驗(yàn)才具有較高的可信度。
2.實(shí)驗(yàn)操作
01
小鼠的抓取固定
1. 小鼠的抓取
(1)右手提起小鼠尾巴,將其放在鼠籠蓋或其他粗糙表面上
(2)小鼠向前掙扎爬行時(shí),再用左手拇指和食指抓住鼠耳和頸部皮膚(如下圖)
抓取固定時(shí)需注意 : 過分用力 , 會(huì)使動(dòng)物窒息或頸椎脫臼 ; 用力過小 , 動(dòng)物頭部能反轉(zhuǎn)來咬傷實(shí)驗(yàn)者的手。因此實(shí)驗(yàn)者必須反復(fù)練習(xí) , 熟練掌握。
2. 小鼠的固定
(1)徒手固定
用右手抓取鼠尾提起,置于鼠籠或?qū)嶒?yàn)臺(tái)向后拉,在其向前爬行時(shí),用左手拇指和食指抓住小鼠的兩耳和頸部皮膚,將鼠體置于左手心中,把后肢拉直,以無名指按住鼠尾,小指按住后腿即可。
(2)固定板固定
鼠麻醉后置小鼠固定板上,取仰臥位, 用膠布纏粘四肢,再用針透過膠布扎在板上,從而將小鼠固定在小鼠固定板上。
(3)固定架固定
讓小鼠直接鉆入固定架里, 封好固定架的封口, 露出尾巴。此裝置特別適用于小鼠尾靜脈注射等。
02
大鼠的抓取固定
大鼠的抓取斯基本同小鼠,只不過大鼠比小鼠牙尖性猛,不易用襲擊方式抓取,否則會(huì)被咬傷手指,抓取時(shí)為避免咬傷,可帶上帆布手套。
如果進(jìn)行腹腔、肌肉皮下等注射和灌胃時(shí),同樣可采用左手固定法,只是用拇指和食指捏住鼠耳,余下三指緊捏鼠背皮膚,置于左掌心中,這樣右手即可進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)操作。也可伸開左手之虎口,敏捷地從后,一把抓住。
若做手術(shù)或解剖等,則需事先麻醉或處死,然后用細(xì)棉線繩活縛腿,背臥位綁在大鼠固定板上;尾靜脈注射時(shí)的固定同小鼠(只需將固定架改為大鼠固定盒即可)。
注意事項(xiàng):
為了減少或避免大鼠在實(shí)驗(yàn)中發(fā)生的應(yīng)激反應(yīng),以減少對(duì)實(shí)驗(yàn)者的攻擊損傷,這里介紹幾種抓取大鼠的技巧改進(jìn):
(1)在抓取前可用一條清潔的毛巾蒙住大鼠全身,大鼠處于黑暗狀態(tài)下神經(jīng)會(huì)有所放松,看不到實(shí)驗(yàn)者的動(dòng)作也會(huì)降低對(duì)實(shí)驗(yàn)者的攻擊機(jī)會(huì);
(2)一般抓取大鼠都會(huì)抓住尾巴,但是有時(shí)大鼠尾巴不在身后而在其面前,這時(shí)實(shí)驗(yàn)者可能在抓取鼠尾的時(shí)候被大鼠攻擊。這種情況一般可以輕推其腰臀部,使之變換姿勢(shì),待鼠尾調(diào)整到身后再進(jìn)行抓取;
(3)由于大鼠尾部被抓起時(shí),會(huì)應(yīng)激性地排便、排尿,所以最好在粗糙表面上墊上報(bào)紙等,做好防范措施,減輕工作量。
3.動(dòng)物給藥方法
在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,為了觀察藥物對(duì)機(jī)能功能、代謝及形態(tài)引起的變化,常需將藥物注入動(dòng)物體內(nèi)。給藥的途徑和方法是多種多樣的,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?shí)驗(yàn)?動(dòng)物種類和藥物劑型等情況確定。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常見的給藥方式有:口服、靜脈注射、腹腔注射、皮下注射、肌肉注射、椎管內(nèi)注射、腦室內(nèi)注射、皮內(nèi)注射、淋巴腔注射、鼻腔和舌下給藥等多種。
01
灌胃法
小鼠灌胃方法比較簡(jiǎn)單,需要關(guān)注的只有兩點(diǎn):一是要保持小鼠的頭部和頸部成一直線,方便灌胃針頭進(jìn)入,二是動(dòng)作要輕柔,從口角進(jìn)入,防止損失食道。
操作步驟:
1. 抓住小鼠,使其頭、頸和身體呈一直線。
2. 用1 ml的注射器配灌胃針頭。灌胃針頭從小鼠的嘴角進(jìn)入,壓住舌頭,抵住上顎,輕輕向內(nèi)推進(jìn),進(jìn)入食管后會(huì)有一個(gè)刺空感,進(jìn)入食道后就可以推注藥液。
3. 灌胃容積一般是0.1~0.2 ml/10 g,最大0.35 ml/10 g,每只小鼠的灌胃最大容積不超過0.8 ml。
經(jīng)驗(yàn)總結(jié):
1. 在操作過程中最重要的是小鼠的固定,注意頭一定要固定好,頭和軀體要保持一條直線,并且灌胃時(shí)使小鼠成豎直位,頭向上。
2. 把握要領(lǐng),動(dòng)作盡量迅速,減少小鼠的不適感。
3. 小鼠灌胃劑量:0.1 ml/10 g體重:一只20 g的小鼠,一般一次灌胃0.2 ml。
4. 操作前將灌胃針安在注射器上大致測(cè)量一下從口腔到胃內(nèi)的位置(最后一根肋骨后緣)的長度,根據(jù)此距離確定插入深度,成年小鼠插入大約3厘米。
5. 固定好小鼠,身體最好伸展在一條直線,太松會(huì)動(dòng),太緊就把小鼠脖子勒住了。一般沿口角進(jìn)針,抵達(dá)咽部會(huì)有抵觸感,小鼠會(huì)有吞咽動(dòng)作,此時(shí)阻力喪失,可繼續(xù)下行。
02
腹腔注射
腹腔注射雖然簡(jiǎn)單,也有翻車的危險(xiǎn)。一針下去,扎到內(nèi)臟,嗚呼哀哉。先將小鼠腹腔注射操作要點(diǎn)總結(jié)如下:
抓鼠后選擇低尾高位的體位;
選擇下腹部腹中線進(jìn)針;
小于60度進(jìn)針有落空感;
回抽未見血后推針,旋轉(zhuǎn)半圈拔針。
腹腔注射適合刺激性小的水溶性藥物的用藥,利用腹腔膜及大小網(wǎng)膜血管豐富,吸收面積大等特點(diǎn),使藥物快速入血。
操作步驟:
1. 抓取小鼠
一般都是放在飼養(yǎng)籠上,提其尾巴中部,水平偏下往后輕拉,小鼠爪子會(huì)自然會(huì)抓住籠子,此時(shí)應(yīng)該迅速抓住小鼠的頸背部的皮毛,最好是抓在小鼠的耳朵處,這樣可以更好固定小鼠的頭部,以防被咬。但是,切記力氣不要過大,容易使小鼠窒息。
再將小鼠的尾巴用左手無名指或小拇指固定,這樣就可以將小鼠整個(gè)軀干固定好,注意一定要讓小鼠處于一個(gè)舒服的體位,如果小鼠軀干不能保持豎直,很容易扎到臟器,引起出血,影響實(shí)驗(yàn)。
2. 注射
抓取小鼠后,應(yīng)腹部向上,頭呈低位。頭呈低位可以使得臟器移至低位,避免扎傷。右手持注射器,插入小鼠腹部,注射部位為小鼠后肢根部連線處任一側(cè)1.5cm處,緩慢以45度左右進(jìn)針,進(jìn)針深度小于1cm,進(jìn)針的感受為局部皮膚凹陷消失和落空感。
3. 拔針:為了防止漏液,輕微旋轉(zhuǎn)針頭,再緩緩拔出。
在實(shí)驗(yàn)前,準(zhǔn)備酒精棉球,注射器在使用后要消毒才能給下一只小鼠使用,避免交叉感染。此外,注射前,也可以用酒精棉球擦拭小鼠皮膚,可以明顯辨別藥物是否注射到腹腔,如果看到鼓包,就是注射到皮下了。
注意事項(xiàng):
1、腹腔注射只宜用等滲藥液(如5%葡萄糖液、0.9%生理鹽水)適當(dāng)配無刺激性的藥物(如肌苷、維生素B1、維生素C),而且注射量不宜太大,注射藥液溫度應(yīng)與體溫相近。
2、注射時(shí),小鼠頭部要呈低位,使內(nèi)臟向胸部側(cè)偏移,針頭不宜過長,以防止刺傷腸道、膀胱或其它內(nèi)臟器官。
3、進(jìn)針時(shí)不要猶豫,切勿為避免刺傷器官,針頭剛插入皮膚就向上挑起,此時(shí)針頭極有可能還沒刺破腹腔壁,只是將液體注射在腹部皮下。
03
靜脈注射
稍微有點(diǎn)難度,沒有指導(dǎo)的話,一開始可能會(huì)感覺有點(diǎn)手足無措。但是可以肯定的說,只要掌握了方法,小鼠的尾靜脈注射還是很容易的。
操作步驟:
1. 固定小鼠最簡(jiǎn)單的固定方法就是把小鼠放在盒子里面,讓它的尾巴伸在盒蓋的外面,用手抓住小鼠尾巴,輕輕往外拽,就可以固定好小鼠了。還有的固定方法就是用一個(gè)小的圓筒,圓筒的一段有個(gè)蓋子可以拿下來,蓋子中間有個(gè)小孔,可以讓小鼠的尾巴伸出來。
2. 固定好小鼠后就是注射了,一般用一次性的1ml的注射器就可以了,玻璃 的1ml的注射器也可以,針頭用4號(hào)(或胰島素針)。
3. 注射前首先要讓小鼠的血管充盈。可以采用75%的酒精棉球擦拭的方法或者采用溫水浸泡的方法。若小鼠的血管很不清楚,推薦采用溫水浸泡的方法,水溫以不燙手為宜。溫水浸泡2~3分鐘后,取出小鼠尾巴,用干棉球擦拭。等一會(huì)兒,待血管充盈后,酒精棉球擦拭后就可以進(jìn)針了。若血管還不充盈,可以反復(fù)用溫水浸泡,切不可冒險(xiǎn)注射。
4. 小鼠尾部共有四條血管,一般認(rèn)為左右的兩條靜脈比較容易注射,多采用這兩條靜脈進(jìn)針。一般要求進(jìn)針部位靠近小鼠的尾端,這樣若注射失敗的話,還可以再向上選擇進(jìn)針點(diǎn)。但是進(jìn)針部位也不可以太靠下,因?yàn)樵酵拢o脈越細(xì),操作越難,一般以小鼠尾巴下三分之一的位置比較好。
5. 最關(guān)鍵的就是進(jìn)針。進(jìn)針時(shí)操作者左手食指和拇指固定住小鼠的尾巴,讓小鼠的尾巴在經(jīng)過拇指后向下彎曲,進(jìn)針點(diǎn)靠近拇指指甲。針頭和血管呈約30°角,針尖斜面朝上,輕輕挑刺入皮膚后針頭立即和血管平行,一般情況下一次就可以進(jìn)入血管,可以將針頭刺入血管一大半,左右輕輕晃動(dòng)針頭,確定針頭在血管內(nèi),就可以推注藥液了,正常情況下,推注的過程應(yīng)該沒有明顯阻力,血管也不會(huì)鼓起。推液時(shí)動(dòng)作宜輕柔,若發(fā)現(xiàn)血管鼓起,那是針頭沒有刺入血管,需立即拔出針頭。
注意事項(xiàng):
1. 小鼠尾靜脈最重要的是小鼠一定要固定好;
2. 一開始最好從小鼠尾靜脈的末端開始注射,如果在中前端注射一旦失敗這樣可以防止注射的數(shù)次失敗后液體漏出;
3. 注射時(shí)手上的感覺很重要,如果針頭進(jìn)入尾靜脈,手上會(huì)有一種透空感,這種感覺只有自己親自經(jīng)歷后才會(huì)有比較深的體會(huì),另外針頭如果進(jìn)入后,液體的推射會(huì)很順利;如果,感覺液體推不進(jìn)去,很費(fèi)力,說明針頭沒有進(jìn)入尾靜脈,而是進(jìn)入了周圍的軟組織。
4. 在注射時(shí),一個(gè)很重要的原則是注射要緩慢,均勻推射,速度不可以快,一旦速度快,小鼠會(huì)發(fā)生充血性心衰;如果一旦出現(xiàn)這種情況,立即停止注射,對(duì)小鼠實(shí)行心臟按摩;
5. 每次注射的劑量:不可以超過0.2毫升;注射劑量過多,也會(huì)發(fā)生充血性心衰
主營項(xiàng)目
1. 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
動(dòng)物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學(xué)檢測(cè)、心功能、無創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動(dòng)生化檢測(cè)等
2. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
CCK8/MTT、原代細(xì)胞分離、流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株
3. 分子生物學(xué)
PCR檢測(cè)、熒光定量PCR、絕對(duì)定量PCR、端粒酶長度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測(cè)等
4. 蛋白實(shí)驗(yàn)
WB、Co-IP、酵母雙雜
5. 病理實(shí)驗(yàn)
HE染色、免疫組學(xué)、電鏡
6. 生理生化實(shí)驗(yàn)
肝腎功能、抗氧化、免疫反應(yīng)等生理免疫指標(biāo);動(dòng)植物營養(yǎng)指標(biāo)、微量元素、重金屬、酶活等。
7. 多組學(xué)實(shí)驗(yàn)
基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析
8. 整體課題實(shí)驗(yàn)
方案設(shè)計(jì)、整體實(shí)驗(yàn)交付、標(biāo)書寫作、論文潤色、協(xié)助投稿
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