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重磅綜述！Nature頂級子刊（IF：113.915）|自噬研究沒有新思路，一文了解

自噬是一個吞噬自身細(xì)胞質(zhì)蛋白或細(xì)胞器并使其包被進(jìn)入囊泡，并與溶酶體融合形成自噬溶酶體，降解其所包裹的內(nèi)容物的過程，借此實現(xiàn)細(xì)胞本身的代謝需要和某些細(xì)胞器的更新。今天小編分享一篇發(fā)表在《Nature reviews Molecular cell biology》雜志上的關(guān)于自噬的綜述文章，IF:113.915。摘要維持蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)和細(xì)胞器完整性和功能對于細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和細(xì)胞活力至關(guān)重要。自噬是介導(dǎo)將各種細(xì)胞貨物運送到溶酶體以進(jìn)行降解和回收的主要機制。大量研究表明自噬對疾病具有重要的保護(hù)作用。然而，在癌癥…

大（小）分子蛋白WB如何跑出漂亮條帶？這幾個步驟一定要優(yōu)化！

Western Blot作為基礎(chǔ)生命科學(xué)檢測方法之一，目前已經(jīng)有適配性較高的通用型實驗檢測方案和流程。但蛋白質(zhì)作為一個特異性較強的檢測指標(biāo)，總會有一些并不適用于常規(guī)方法，且需要我們對實驗步驟進(jìn)行優(yōu)化或者修改，才能保證得到較為理想的結(jié)果。如果你研究的蛋白分子量較大或較小，且苦于一直跑不出好看的WB結(jié)果，那么這篇文章一定可以幫到你！WB實驗一般流程什么是大/小分子蛋白1）大分子蛋白大分子蛋白一般指WB檢測中分子量＞200kDa的蛋白質(zhì)，由于其分子量大，遷移速度慢，轉(zhuǎn)膜困難等特…

疾病動物模型-心肌梗死模型

在醫(yī)學(xué)研究中，心肌梗死模型是一種重要工具，能夠幫助科學(xué)家深入理解心肌梗塞的病理生理機制和治療方法的發(fā)展。通過模擬心肌梗塞的發(fā)生過程，研究人員可以更精確地探索疾病的發(fā)病機制、評估治療效果，進(jìn)而推動臨床實踐的進(jìn)步。本文將從心肌梗死的疾病背景出發(fā)，詳細(xì)探討其發(fā)病機制，綜述近年來在動物模型方面的研究進(jìn)展，重點介紹小鼠心肌梗死模型的手術(shù)步驟及操作要點，并對模型的表型評價方法進(jìn)行詳細(xì)分析，旨在為相關(guān)研究提供參考。心肌梗死疾病背景心肌梗死（myocardial infarctio…

【國自然熱點推薦】巨噬細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)現(xiàn)狀+機制+實驗 | 一文統(tǒng)統(tǒng)搞定！

巨噬細(xì)胞極化、巨噬細(xì)胞鐵死亡、巨噬細(xì)胞代謝重編程、巨噬細(xì)胞吞噬、巨噬細(xì)胞遷移……小編想一定是這些研究熱點的堆積，才一步步把巨噬細(xì)胞送上“國自然榜一”的地位~在這些研究熱點中，有一個隱藏頗深的熱點可能很多小伙伴們還沒發(fā)現(xiàn)，今天小編把它揪出來“公之于眾”，讓更多小伙伴們知道，巨噬細(xì)胞竟還會“布下天羅地網(wǎng)”！噔~噔~噔~今天的重磅推薦——巨噬細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)（Macrophage Extracellular Traps，METs）來啦！巨噬細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)——研究現(xiàn)狀深知大家時間寶貴，小編直接…

一文拯救 WB 實驗！Western blot 內(nèi)參選擇避坑全攻略

一、常見的內(nèi)參抗體 1.β-actin（42 kDa）特點：β-actin 是細(xì)胞骨架的重要組成部分，廣泛存在于大多數(shù)細(xì)胞和組織中，其表達(dá)相對穩(wěn)定，且與眾多目標(biāo)蛋白的分子量差異較大，便于在 Western blot 實驗中區(qū)分。局限性：在肌肉組織中，β-actin 的高表達(dá)可能影響內(nèi)參的準(zhǔn)確性。此外，其聚合狀態(tài)易受細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響，從而導(dǎo)致表達(dá)水平發(fā)生變化。因此，在肌肉組織相關(guān)研究或涉及細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的實驗中，建議優(yōu)先選擇其他內(nèi)參抗體，如 GAPDH 或 β-tubulin。2.GAPDH（36 kDa）特點：GAPDH…

告別玄學(xué)！一文搞懂 PCA 降維原理+ 避坑指南

生物醫(yī)學(xué)研究的浩瀚海洋中，我們常常面臨著海量且高維度的數(shù)據(jù)洪流。以基因數(shù)據(jù)為例，每一個樣本都承載著成千上萬個基因的測量指標(biāo)，每一個基因都宛如一個獨特的特征維度，共同構(gòu)成了一個復(fù)雜龐大的多維數(shù)據(jù)空間。然而，人類的認(rèn)知能力在面對如此高維度的數(shù)據(jù)時，往往顯得力不從心，難以直觀地洞察樣本之間的內(nèi)在差異與聯(lián)系。此時，主成分分析（PCA，principal component analysis）便如同一座明亮的燈塔，為我們在數(shù)據(jù)的迷霧中指引方向。PCA 是一種經(jīng)典的降維方法，其核心理念在于從眾…

細(xì)胞遷移 / 侵襲實驗全攻略

細(xì)胞遷移和侵襲是生物學(xué)研究中常見的現(xiàn)象，也是疾病發(fā)展過程中重要的環(huán)節(jié)。細(xì)胞遷移/侵襲實驗作為一種常用的生物醫(yī)學(xué)實驗，旨在評估細(xì)胞的侵襲和遷移能力，尤其是對細(xì)胞在模擬體內(nèi)的生理環(huán)境下的行為進(jìn)行模擬和觀察，一般在腫瘤惡性化表型研究中最常見。因為在腫瘤治療中，普遍認(rèn)為抑制腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲是有效的治療手段。因此在對腫瘤細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)（過表達(dá)、敲低、敲除、點突變、藥物處理）后對細(xì)胞的遷移與侵襲能力進(jìn)行檢測，可以作為評估干預(yù)效果的一個有效指標(biāo)。No.1細(xì)胞遷移/侵…

【實驗技術(shù)】外泌體示蹤方法，你值得擁有！

外泌體專題系列又來啦，先前我們一起研究分享了外泌體的分離提取與鑒定，那接下來我們要知道，外泌體作為傳遞重要信息的載體，它最終又哪去了呢？這不，科學(xué)家們紛紛想出奇招，給外泌體添加了各種“GPS定位系統(tǒng)”標(biāo)記它的行蹤，今天我們就一起了解下外泌體的示蹤方法，了解這些方法是如何帶我們探究外泌體的生物分布、生理功能、遷移和靶向機制的~先來向大家介紹一下目前比較常見的外泌體示蹤方法~一、親脂性熒光染料示蹤外泌體目前常用的親脂性熒光染料包括DiO、Dil、DiR、DiD、PKH26…

【國自然熱點推薦】腫瘤免疫治療+腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞研究思路 | 王炸組合研究思路保你茅塞頓開

隨著人類對癌癥的了解越發(fā)深入，對癌癥的研究也不再局限于癌細(xì)胞本身，而是將目光投放于癌細(xì)胞置身的環(huán)境——腫瘤微環(huán)境（Tumor microenvironment，TME）中。TME中浸潤著諸多免疫細(xì)胞，這些人體中的“戰(zhàn)士”們毫無疑問處于抗擊腫瘤的最前線，而輔助這些“戰(zhàn)士”的治療手段——腫瘤免疫治療，則在近年逐漸成為國自然的一大熱點。腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（Tumor-associated macrophages，TAMs）作為TME中分布最廣泛的一類細(xì)胞，順理成章地成為了腫瘤免疫治療中的關(guān)鍵角色，相關(guān)國自然中標(biāo)項目更…

T細(xì)胞耗竭與膽固醇代謝的關(guān)系：或可應(yīng)用于腫瘤免疫治療

今天給大家?guī)淼倪@篇文章2023年5月發(fā)表在Cancer Cell上，論文標(biāo)題為“Exhaustion-associated cholesterol deficiency dampens the cytotoxic arm of antitumor immunity”。中科院分子細(xì)胞科學(xué)卓越創(chuàng)新中心許琛琦團(tuán)隊與武漢大學(xué)生科院宋保亮院士團(tuán)隊合作，研究繪制了腫瘤微環(huán)境中膽固醇圖譜，揭示膽固醇缺乏驅(qū)動腫瘤微環(huán)境中T細(xì)胞耗竭和功能障礙的機制。通過CRISPR-Cas9敲除CAR-T細(xì)胞的LXRβ，能夠解除膽固醇缺乏導(dǎo)致的T細(xì)胞耗竭和功能障礙，從而顯著增強CAR-T的肝癌治療效果。臨床問…

動物實驗知多少——裸鼠皮下成瘤實驗技巧

背景裸鼠成瘤實驗，是一種用于研究腫瘤發(fā)生和發(fā)展的動物實驗。裸鼠是一種無毛、免疫缺陷的小鼠，在體內(nèi)移植外源性腫瘤細(xì)胞后，由于其免疫系統(tǒng)不完整，不會對異物產(chǎn)生免疫反應(yīng)，因此，腫瘤細(xì)胞可以不受抵抗地存活和生長。通過裸鼠成瘤實驗，可以研究腫瘤細(xì)胞在體內(nèi)的生長、轉(zhuǎn)移、藥物治療等方面的情況，為開發(fā)新的腫瘤治療方法和藥物提供重要的實驗數(shù)據(jù)。但是，裸鼠成瘤實驗涉及動物權(quán)益和倫理問題，需要在符合倫理和法律規(guī)定的條件下進(jìn)行。實驗室常見成瘤細(xì)胞/Common tumorigenic cell…

IF 23.1Gut|乳酸化修飾新突破！復(fù)大虞先濬團(tuán)隊揭示“乳酸代謝-表觀遺傳-膽固醇免疫抑制軸”新機制，內(nèi)容實在精彩！

說到乳酸化這個賽道，第一想到的就是一系列頂刊，這個賽道可以說是是臥虎藏龍！就乳酸化修飾的文章，隨隨便便找出一篇都很不錯，這不今天就發(fā)現(xiàn)一篇內(nèi)容是非常精彩的文章，跟著康旭禾一起來看看吧~看文章之前咱們來看看這篇文章的作者：虞先濬教授，現(xiàn)任復(fù)大腫瘤醫(yī)院院長，主要研究集中在胰腺方向。總IF超過1600分，在《Cancer Cell》《Cell Res》《J Clin Oncol》等發(fā)表SCI論文260+，單篇論著最高IF 48.8.可以看出虞教授也是咱們的標(biāo)桿人物了，大佬的思路可得好好學(xué)一下，那就說說該團(tuán)…

干貨收藏 | WB, IHC實驗問題總結(jié)與處理方案詳解

1、western blot 的優(yōu)點答：靈敏，可達(dá)ng級，用Ecl顯色法理論上可達(dá)pg 級。方便，特異性高。2、為什么我的細(xì)胞提取液中沒有目標(biāo)蛋白？答：原因有很多：a) 你的細(xì)胞中不表達(dá)這種蛋白質(zhì)，換一種細(xì)胞；b) 你的細(xì)胞中的蛋白質(zhì)被降解掉了，你必須加入PMSF，抑制蛋白酶活性；c) 你的抗體不能識別目標(biāo)蛋白，多看看說明，看是否有問題。3、我的細(xì)胞提取液有的有沉淀，有的很清亮，為什么呢？答：a) 有沉淀可能因為你的蛋白沒有變性完全，可以適當(dāng)提高SDS 濃度，同時將樣品煮沸時間延長， …

腫瘤研究基礎(chǔ)---Transwell遷移/侵襲實驗

對腫瘤的研究，主要包括功能研究和機制研究，細(xì)胞功能的研究主要是體現(xiàn)腫瘤生物學(xué)特性。其中腫瘤細(xì)胞的遷移、侵襲功能研究是必不可少的，腫瘤細(xì)胞的遷移侵襲能力的研究，也為后續(xù)信號通路、功能機制研究打下基礎(chǔ)。 Transwell 遷移、侵襲實驗主要用于檢測腫瘤細(xì)胞體外的遷移、侵襲能力，由此可見，做好Transwell遷移侵襲實驗是至關(guān)重要的。1.實驗原理 將Transwell小室放入培養(yǎng)板中，小室內(nèi)稱上室，培養(yǎng)板內(nèi)稱下室，上室內(nèi)盛裝上層培養(yǎng)液，下室內(nèi)盛裝下層培養(yǎng)液，上下層培養(yǎng)液以…

經(jīng)典蛋白翻譯后修飾----乙酰化修飾

蛋白質(zhì)乙酰化修飾，顧名思義指的就是在蛋白質(zhì)原有基礎(chǔ)上面嫁接上乙酰化基團(tuán)。在細(xì)胞中，乙酰化修飾的反應(yīng)由乙酰基轉(zhuǎn)移酶所催化，將乙酰輔酶A的乙酰基轉(zhuǎn)移并添加在蛋白質(zhì)賴氨酸殘基上。在早期的研究中，乙酰化修飾一直被認(rèn)為是真核細(xì)胞所特有的一種翻譯后修飾，直到后來研究發(fā)現(xiàn)原核細(xì)胞中也存在著蛋白質(zhì)乙酰化修飾。所以，乙酰化修飾是原核和真核生物所共有的一種翻譯后修飾類型。 蛋白的乙酰化修飾早在20世紀(jì)60年代就被發(fā)現(xiàn)了，但真正受到科學(xué)界“追捧”卻是經(jīng)歷長達(dá)半個世紀(jì)的“…

文獻(xiàn)精讀——代謝+銅死亡雙重調(diào)控拿下IF=48.8 Cancer Cell

01文章基本信息周楊、姚兵等團(tuán)隊在《Cancer Cell》（IF=48.8）發(fā)表的研究揭示，缺氧誘導(dǎo)因子 - 1α（HIF-1α）調(diào)控腫瘤銅死亡，其核心機制包括 HIF-1α 通過激活 PDK1/3 抑制線粒體 TCA 循環(huán)關(guān)鍵酶 DLAT 表達(dá)、促進(jìn)金屬硫蛋白 MT2A 積累以螯合線粒體銅，以及銅離子直接結(jié)合 HIF-1α 抑制其泛素化降解并穩(wěn)定蛋白原文鏈接：https://doi.org/10.1016/j.ccell.2025.02.01502文章概述研究背景銅死亡機制與銅穩(wěn)態(tài)失衡及 TCA 循環(huán)中脂酰化蛋白異常聚集相關(guān)。實體腫瘤常處于缺氧微環(huán)境，而缺氧…

細(xì)胞焦亡研究方法匯總

程序性細(xì)胞死亡(Programmed Cell Death, PCD)，是指細(xì)胞接受某種信號或受到某些因素刺激后，為了維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定而發(fā)生的一種主動性消亡過程。凋亡、自噬、細(xì)胞程序性壞死、細(xì)胞焦亡都是是程序性死亡的表現(xiàn)形式。細(xì)胞焦亡是一種最新發(fā)現(xiàn)的炎癥細(xì)胞程序性死亡方式，主要通過炎癥小體介導(dǎo)包含Caspase-1在內(nèi)的多種Caspase的激活，造成包括GSDMD在內(nèi)的多種Gasdermin家族成員發(fā)生剪切和多聚化，造成細(xì)胞穿孔，進(jìn)而引起細(xì)胞死亡。相比于細(xì)胞凋亡（apoptosis），細(xì)胞焦亡發(fā)生的更快，并會伴隨著…

速存！常用的實驗鼠 + 動物實驗技術(shù)

動物疾病模型主要用于實驗生理學(xué)、實驗病理學(xué)和實驗治療學(xué)(包括新藥篩選)研究。人類疾病的發(fā)展十分復(fù)雜，臨床積累的經(jīng)驗不僅在時間和空間上都存在局限性，而且在方法和道義上也受到限制。借助于動物模型的間接研究，可以有意識地改變那些在自然條件下不可能或不易排除的因素，以便更準(zhǔn)確地觀察模型的實驗結(jié)果并與人類疾病進(jìn)行比較研究，有助于更方便，更有效地認(rèn)識人類疾病的發(fā)生發(fā)展規(guī)律，研究防治措施。1.方案設(shè)計01常用動物實驗選擇1. 名 稱：KM 小鼠主要用途：廣泛應(yīng)用于藥理學(xué)、毒…

2025年腫瘤研究的熱點方向：乳酸化修飾

在腫瘤的復(fù)雜世界里，代謝異常與免疫逃逸始終是兩大核心難題。最新研究發(fā)現(xiàn)，一種由乳酸驅(qū)動的賴氨酸乳酰化修飾（Lactylation），正成為連接代謝與免疫的關(guān)鍵 “分子橋梁”。它不僅重塑腫瘤微環(huán)境（TME），還為腫瘤耐藥（靶向治療、免疫治療、化療）提供了溫床。今天，我們將深入解讀這一前沿領(lǐng)域，揭開腫瘤代謝調(diào)控的神秘面紗。一、乳酸化修飾：從代謝廢物到致癌信使長久以來，乳酸被視為腫瘤細(xì)胞糖酵解的“廢物”，但近年來研究發(fā)現(xiàn)，它竟是一種關(guān)鍵的表觀遺傳調(diào)控分子。什么是乳酰化…

國自然潛力熱點——“調(diào)節(jié)性B細(xì)胞”來襲！南醫(yī)大團(tuán)隊也在做，出手就是11分+，快上車！

在咱們所熟悉的免疫細(xì)胞亞群中，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（CD4+Treg）應(yīng)該是大家關(guān)注的比較多的亞群吧。但是今天薇老師想給大家分享點不一樣的，咱們來聊聊調(diào)節(jié)性B細(xì)胞（Bregs）。首先，什么是Bregs呢？這是一類具有免疫調(diào)節(jié)功能的B淋巴細(xì)胞亞群。傳統(tǒng)B細(xì)胞主要負(fù)責(zé)通過產(chǎn)生抗體的形式清除病原體，而Bregs則主要通過分泌細(xì)胞因子或與其他免疫細(xì)胞互作調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，以維持免疫系統(tǒng)穩(wěn)態(tài)。而也正是因為Bregs在免疫調(diào)節(jié)中的關(guān)鍵作用，因此它在腫瘤、自身免疫疾病、感染性疾病、過敏性疾病、代謝性疾病…